Resistencia antimicrobiana y efecto antifúngico

Actividad antibiótico y antifúngica de B. cepacia provenientes de ambientes nosocomiales.

Burkholderia cepacia, es un bacilo Gram negativo, no fermentador, reconocido como causal de infecciones oportunistas; además de producir compuestos con actividad antimicrobiana. En el presente estudio se evaluó el antagonismo de nueve (9) aislados nosocomiales de B. cepacia contra hongos filamentosos, levaduras y bacterias de ambientes hospitalarios. La detección antibacteriana y antifúngica, se determinó según la técnica de la doble capa y de los cortes cilíndricos en agar, respectivamente. Cuatro aislados de B. cepacia (CVCM: 626,1328, 1331 y 1332) inhibieron los diferentes géneros bacterianos analizados. B. cepacia CVCM 1332, inhibió a cinco (5) de las seis (6) especies de bacterias indicadoras, con halos de inhibición entre 11 y 22 mm; a excepción de P. fluorescens. Tres (3) aislados de B. cepacia no presentaron actividad antibacteriana. Dos aislados de B. cepacia inhibieron los hongos estudiados (Fusarium solani, Penicillium citrinum, Penicillium frequentans, Aspergillus niger, Aspergillus ochoraceus, Penicillium echinulatum, Candida tropicalis, Candida famata). Las cepas CVCM 626, 1328 y 1331 presentaron tanto actividad antibacteriana como antifúngica. Se comprobó el antagonismo de aislados nosocomiales de B. cepacia contra bacterias y hongos de ambientes hospitalarios, representando un factor importante en la colonización de áreas críticas, facilitando la aparición de cuadros infecciosos en pacientes allí recluidos (Araque, et al.,2007).

Resultados

• Actividad antagónica

Los resultados del ensayo para medir el efecto antibacteriano (Tabla 1), indicaron que de las nueve (09) cepas estudiadas, cuatro (04) produjeron efecto antagónico contra los diferentes géneros bacterianos analizados (cepas indicadoras). Se observó un efecto inhibitorio en la cepa E. coli CVCM 35 productora de colicina contra el aislado E. coli CVCM 178 indicadora, representando éste el control del experimento. B. cepacia CVCM 626 (ATCC 25416) produjo el mayor efecto inhibitorio contra E. coli, S. aureus, Bacillus subtilis y Pseudomonas fluorescens; asimismo, tres (03) de los aislados de B. cepacia produjeron efecto inhibitorio contra los aislados de B. subtilis CVCM 591 y S. aureus CVCM 925. B. cepacia CVCM 1332 presentó mayor actividad antagónica al inhibir a cinco (05) de las seis (06) especies bacterianas indicadoras, observándose halos de inhibición entre 11 y 22 mm, siendo P. fluorescens la única especie no inhibida. En cinco (05) aislados de B. cepacia (CVCM: 1329, 1330, 1356, 1357, 1282) no se observó efecto antagónico contra las diferentes especies bacterianas ensayadas. En la Figura 1, se observa el efecto antibacteriano de aislados de B. cepacia CVCM 626 y CVCM 1328 frente A: S. aureus (CVCM 925) y B: B. cepacia CVCM 626 frente a B: E. coli (CVCM 178) (Araque, et al.,2007).

Tabla 1. Efecto antibacteriano de aislados de Burkholderia cepacia productoras de sustancias tipo antibiótico.

• Actividad antifúngica

El efecto antifúngico de B. cepacia se evidenció en cinco (05) de los nueve (09) aislados (Tabla 3). Los aislados B. cepacia CVCM 626 y CVCM 1328, mostraron un comportamiento antagónico similar, produciendo inhibición contra las ocho (08) especies fúngicas. El mayor efecto inhibitorio se evidenció en B. cepacia CVCM 1328 contra Aspergillus ochraceus y Penicillium citrinum con 26 y 24 mm de inhibición, respectivamente; mientras que los aislados B. cepacia CVCM 1357 y B. cepacia CVCM 1331 inhibieron menor cantidad de especies fúngicas. El menor efecto antagónico de los aislados de B. cepacia, se observó contra Aspergillus niger, ya que sólo presentó inhibición en presencia de B. cepacia CVCM 626 y CVCM 1328, con halos de inhibición de 8 y 13 mm, respectivamente. En la Figura 2 se observa el efecto antagónico de aislados de B.cepacia A: CVCM 626 y 1328 frente A. Níger y B: CVCM 626,1328, 1331 y 1357 frente a C. tropicales (Araque, et al.,2007).

Tabla 2. Efecto antifúngico de aislados de Burkholderia cepacia productoras de sustancias tipo antibiótico.

Discusión

La detección de especies bacterianas productoras de sustancias antagónicas representa el inicio de estudios sobre frecuencia y distribución de estos compuestos, siendo la etapa previa a su purificación y caracterización bioquímica; en el caso particular de aislados nosocomiales de B. cepacia, es importante el conocimiento de los mecanismos antagónicos desarrollados por la bacterias como una estrategia para competir en ambientes hostiles y dominar el hábitat.

El efecto antibacteriano y antifúngico de B. cepacia, fue comprobado en la cepa B. cepacia CVCM 626 (ATCC 25416), y en 02 aislados procedentes de muestras nosocomiales; observándose el mayor efecto contra hongos aislados a partir de muestras recolectadas del ambiente hospitalario. Asimismo, del total de cepas bacterianas ensayadas, en el presente estudio se observó que sólo un aislado presentó actividad antibacteriana a diversos géneros, específicamente, E. coli, S. aureus, B. subtilis, BGNNF y P. aeruginosa. Estos resultados destacan el papel que desempeña B. cepacia como bacteria predadora, capaz de inhibir el crecimiento de diversos microorganismos, aunado a la resistencia intrínseca de la bacteria para aminoglicósidos presente en los aislados ensayados, así como también a antibióticos beta-lactámicos como carbapenémicos y monobactámicos (Araque y col., en proceso de publicación ). Sin embargo, los aislados ensayados presentaron un patrón de susceptibilidad uniforme a piperacilina, ciprofloxacina, Trimetoprim Sulfametoxazol, ceftazidima y piperacilina tazobactam, por lo que no se puede establecer una relación de la resistencia con los aislados que presentaron actividad antagónica.

Es importante destacar que el efecto antagónico se observó tanto en el aislado ambiental B. cepacia CVCM 626 como en dos aislados nosocomiales, esto puede considerarse como una condición particular de algunos miembros del Complejo B.cepacia ( B. vietnamensis, B. ambifaria, B. cenocepacia ) las cuales se han reportado con actividad antibiótica y/o de biocontrol. Sin embargo, el antagonismo presente en aislados hospitalarios pudiera contribuir con la virulencia bacteriana, a través de la colonización de ambientes hospitalarios, facilitando de este modo su diseminación y la transferencia de elementos genéticos mediadores de resistencia como plásmidos, entre el mismo género y otros relacionados, incrementándose así la producción de cuadros infecciosos en pacientes inmunosuprimidos.

El efecto antibacteriano y antifúngico de B. cepacia proveniente de fuentes ambientales, se ha demostrado en diversos estudios, donde se han evaluado diferentes mecanismos antagónicos, tales como producción de enzimas extracelulares, antibióticos y competencia por nutrientes, siendo de interés la producción de compuestos volátiles capaces de inhibir el crecimiento de hongos patógenos a las plantas como, C. neoformans, Trichoderma viride, Sacharomices cerevisiae, así como tambien frente a géneros bacterianos. S. aureus, P. aeruginosa, B. subtilis. Sin embargo, son escasos los reportes sobre actividad antibiótico y antifúngica en aislados nosocomiales de B. cepacia. En el presente estudio, se pudo evidenciar el amplio espectro antagónico contra hongos de ambientes hospitalarios, estos resultados coinciden con estudios anteriores donde se evidencia además la secreción de sustancias que pueden degradar las paredes de las células fúngicas mediante la producción de enzimas extracelulares como proteasas, lecitinasas, elastasas, entre otras. Así también, la producción de compuestos antifúngicos y con actividad hemolítica por B. cepacia como pyrrolnitrin y cepalycinas pueden contribuir a la patogenicidad de la bacteria, proporcionando a la misma la capacidad de competir en diversos ambientes naturales y hospitalarios.

En los últimos años se han publicado estudios relativos a evaluaciones ecológicas, clínicas y de aspectos biotecnológicos de especies individuales dentro del complejo B. cepacia, así como de especies diversas, con el propósito de dilucidar las incógnitas sobre los diferentes miembros del Complejo Burkholderia cepacia y determinar el potencial patogénico de las cepas ambientales en la fibrosis quística e infecciones nosocomiales, así como su perspectiva en el campo biotecnológico; al respecto se han descrito especies con amplio espectro de actividad antimicrobiana, B. ambifaria 2.2 N y B. cepacia 670-2 , las cuales tienen la habilidad de inhibir el crecimiento de una gran variedad de microorganismos.

(Araque, et al.,2007)

Conclusión.

En conclusión, se comprobó la actividad antagónica particular de algunos de aislados nosocomiales de B. cepacia contra bacterias y hongos de ambientes hospitalarios, atribuido a la producción de sustancias extracelulares o sustancias tipo antibiótico. Además, se evidenció la capacidad competitiva de esta bacteria en el ambiente hospitalario, al inhibir una variedad de géneros bacterianos, representando éste un factor importante en la colonización de áreas críticas hospitalarias, lo que pudiera facilitar la aparición de cuadros infecciosos en pacientes allí recluidos. Sin embargo, es necesario considerar un estudio más amplio con un mayor número de aislados y provenientes de diversas fuentes (Araque, et al.,2007). 

Referencias bibliográficas:

Araque, Y., Albarado, L., Centeno, S., Rodríguez-Lemoine, V., & Vitelli-Flores, J. (2007). Actividad antibiótico y antifúngica de B. cepacia provenientes de ambientes nosocomiales: Servicio Autónomo Hospital universitario Antonio Patricio Alcalá. Cumaná, Venezuela. Kasmera, 35(2), 107-117.