Pruebas bioquímicas

 PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Prueba de Ureasa

Esta prueba es utilizada para determinar la capacidad que tienen los microorganismos para hidrolizar la urea, formando así dos moléculas de amoníaco por la acción de la enzima ureasa.

Fundamento

La tripteína y glucosa son las encargadas de aportar los nutrientes necesarios para el desarrollo de microorganismo. El rojo de fenol es el indicador de pH del medio y el cloro de sodio se encarga de mantener el equilibrio osmótico. En esta prueba el microorganismo hidroliza la urea a través de la enzima ureasa, en la que se liberará amoníaco y dióxido de carbono. Dichos productos se encargar del cambio de coloración del medio, es decir, del amarillo al rojo. 

Interpretación de resultados

Se tiene que observar la coloración del medio de cultivo (ver figura 1).

• Microorganismos que hidrolizan la urea: medio de cultivo color rosado-rojizo.
• Microorganismos que no hidrolizan la urea: medio de cultivo permanece de color amarillo.

Figura 1. Prueba de Ureasa. Nota. Adaptado de SERIES DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA

(UREA, CITRATO, LISINA, SIM Y TSI) [Imagen], por MDM, 2020 de https://mdmcientifica.com/wp-content/uploads/2021/03/IS-24-SERIES-DE-IDENTIFICACION-BIOQUIMICA.pdf 

Resultados

El resultado se considera positivo porque la bacteria  Burkholderia cepacia posee la enzima ureasa que logra degradar la urea, dando origen al amoníaco y dióxido de carbono. 

(Britania, 2021).

Prueba de Oxidasa

Determina si una bacteria presenta enzimas oxidasas. 

Fundamento

La reacción de esta prueba, la cual es una reacción de la oxidasa se lleva acabo en un sistema citocromooxidasa que va a activar la oxidación del citocromo y es reducido por el oxigeno produciendo agua o peróxido de hidrogeno de acuerdo con la especie bacteriana que se trate de identificar. El oxígeno actúa en la cadena de transporte de electrones y por lo tanto, será el aceptor final.

Interpretación de resultados

• Positiva: color rosado a púrpura en segundos.
• Negativa: no  hay cambio de coloración (ver figura 2). 

Figura 2. Prueba de oxidasa. Nota. Adaptado de Prueba de oxidasa: fundamento, procedimiento y usos [Imagen], por Gil, M., 2021 de https://www.lifeder.com/prueba-de-oxidasa/

Resultado

El resultado se considera positivo porque en la bacteria Burkholderia cepacia se encuentra el sistema citocromooxidasa al ser una bacteria aerobia.

(Cercenado y Cantón, 2010).

Prueba de Catalasa

Detectan la producción de la enzima catalasa en el organismo.

Fundamento

La catalasa es una enzima que la podemos encontrar en una gran cantidad de microorganismos que poseen citocromos. Los microorganismos que sintetizan la catalasa son capaces de catalizar la descomposición de peróxido de hidrógeno, es decir, producen la liberación de agua y oxígeno. 

Interpretación de resultados

• Positiva: se produce burbujeo.
• Negativa: no presenta reacción alguna (ver figura 3). 

Figura 3. Prueba de catalasa. Nota. Adaptado de PRÁCTICA 2: PRUEBAS BIOQUÍMICAS (OXIDASA, CATALASA E INVIC), por WordPress, 2022 de https://control2saonline.wordpress.com/2020/01/20/practica-2-pruebas-bioquimicas-oxidasa-catalasa-e-invic/

Resultado

El resultado de esta prueba para Burkholderia cepacia es catalasa: positiva, ya que es capaz de hidrolizar al peróxido de hidrógeno. 

(Cercenado y Cantón, 2010).

Referencias bibliográficas

Britania. (2021). Christensen Medio (Urea Agar Base). Britanialab. https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_6054e95043249.pdf

Cercenado, E. & Cantón, R. (2010). 37. Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología (p. 6). Procedimientos en Microbiología Clínica.  https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia37.pdf